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耗材專區(qū) | Empore™ C18 96孔板在肽段脫鹽過程中的應(yīng)用

更新時間：2025-04-11       點擊次數(shù)：3872
前言
在蛋白質(zhì)組學(xué)研究中，C18 96孔板被廣泛應(yīng)用于肽段脫鹽和純化步驟，尤其適用于高通量樣本處理，為下游質(zhì)譜分析提供高質(zhì)量樣本。

 

 

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Empore™ C18 96孔板簡介

 

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Empore™ C18膜式固相萃取96孔板專為高通量固相萃取而設(shè)計，板的每個孔內(nèi)都有一個有效直徑為5.5mm的C18固相萃取膜，固相萃取膜和其上方的預(yù)過濾層被壓環(huán)固定到每個孔的底部，預(yù)過濾層可有效提高大多數(shù)生物樣品前處理流速。有效直徑是指可用于樣品處理的萃取膜實際使用直徑。標準板的單孔儲液體積為1.2mL，深孔板的單孔儲液體積為2.5mL。如果樣品或試劑的體積超過板的單孔儲液體積，可分批次加液。

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Empore™ C18 96孔板技術(shù)優(yōu)勢

 

  • 高通量、低樣本損失、兼容自動化設(shè)備。
  • 致密且穩(wěn)定的膜結(jié)構(gòu)消除了散裝填料孔板中存在的溝流和孔洞的問題，數(shù)據(jù)重現(xiàn)性更高。
  • 薄薄的膜結(jié)構(gòu)更易被洗脫，回收率更高。

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C18 96孔板脫鹽原理

 

C18鍵合相（十八烷基硅烷）通過疏水相互作用吸附肽段，去除鹽分、去垢劑等雜質(zhì)，隨后用有機溶劑洗脫肽段，實現(xiàn)脫鹽和濃縮。

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實驗前準備

 

1、材料與試劑
  • CDS Empore™ C18 96孔板（貨號：70-2007-3982-2EA，規(guī)格：6015 C18-SD PLATE, 1.2mL, 1PCS）

  • 緩沖液：

活化/平衡液：0.1%三氟乙酸（TFA）水溶液;

洗滌液：0.1% TFA/5%乙腈（ACN）;

洗脫液：0.1% TFA/50-80% ACN（或70% ACN/0.1%甲酸）。
  • 真空抽濾裝置或離心機（適配96孔板）
  • 肽段樣本（酶解后的復(fù)雜混合物）

2、板預(yù)處理

  • 活化：每孔加入200μL 100% ACN，靜置1分鐘，抽干。

  • 平衡：每孔加入200μL 0.1% TFA，重復(fù)2次，確保填料親水化。

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脫鹽步驟

 

1、上樣

 

 

2、洗滌

 

 

3、洗脫

 

 

4、干燥

 

 

06


關(guān)鍵參數(shù)優(yōu)化

 

1、流速控制

 

 

2、有機相比例

 

 

3、樣本載量

 

 


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應(yīng)用場景

 

1、質(zhì)譜前處理

 

 

2、分級洗脫

 

 

3、自動化整合

 

 

 

 

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